脱磷试验中菌株的选育十分关键
将试验用菌种接种至查氏周体培养基中,再转接种至富磷培养基中,放入摇床内,在30℃、150r/min转速条件下活化2次,每次2d,备用。取活化后的菌种1mL接种至装有100mL含0.090g磷酸钙及0.2612gMnO2(MnO2)的量根据ω(P)/ω(Mn)=0.0109计算所得)的缺磷培养基的三角烧瓶中,在30℃下,于150r/min转速摇床中好氧培养,洗矿机考察pH和磷浓度的变化。以模拟锰矿脱磷试验中效果最好的P69号菌株为发菌株。
(1)菌悬液的制备。将P69菌株活化后用适量生理盐水洗下菌苔,倒入盛有玻璃珠的锥形瓶中,强烈振荡将菌块打破后,离心(3000r/min)20min,弃去上层清液,将菌体用无菌生理盐水洗涤2次,最后制成菌悬液,用血球计数板在显微镜下直接计数,调整菌液浓度至108个/mL。
(2)紫外线处理。打开15W紫外灯开关,预热20min。在无菌条件下,用移液管移取6ml上述菌悬液,放入9cm的无菌培养皿中,再放入一无菌磁力搅拌棒,然后置于紫外灯下30cm处,照射时间分别为2,4,6min。
在红灯下,将处理过的菌悬液稀释至10-5,10-6,10-7,郑州雷蒙磨涂布在PKO无机磷培养基上,每种浓度的菌液涂3个平板,同时取未经紫外线处理的稀释菌液涂于平板上作对照。用报纸包好,避免光照,置于恒温培养箱中于28℃下培养48h。
(3)筛选。诱变菌株的筛选(初筛和复筛)方法与1.4.2相同。取诱变后的P-2-8菌液30mL接种至装有150mL软锰矿矿浆缺磷培养基的三角烧瓶中(矿将固体质量分数为20%),基他方法同3。
